动画讲述了一只名叫做暮光闪闪/紫悦（Twilight Sparkle）的独角兽，要执行她导师塞拉斯缇娅公主/宇宙公主（Princess Celestia）的任务，在小马镇/小马谷（Ponyville）学习关于友谊的知识。她与另外五只小马，苹果杰克/苹果嘉儿（Applejack）、瑞瑞/珍奇（Rarity）、云宝黛西/云宝（Rainbow Dash）、小蝶/柔柔（Fluttershy）与萍琪/碧琪（Pinkie Pie），成为最要好的朋友。每只小马都分别代表了友谊的6个元素：诚实，慷慨，忠心，善良，欢笑，魔法，并在谐率水晶/和谐之元（Elements of Harmony）中，各自扮演着属于自己的重要角色。在动画中，随时可见她们在小马镇/小马谷（Ponyville）的种种冒险、奇遇、日常等等。同时，也在她们之间的互动和冲突中，寻找着最适合最合理的完美解决方案。“尽管小马国并不太平，六位主角之间也常常有这样那样的问题，但是他们之间的真情对代，使得这个童话世界已经成为不少人心中理想的世外桃源。”